A esterilização pode ser conseguida através de uma combinação de calor, produtos químicos, irradiação, alta pressão e filtração como vapor sob pressão, calor seco, radiação ultravioleta, esterilizantes a vapor, gás de dióxido de cloro, etc. Técnicas de esterilização eficazes são essenciais para o trabalho em laboratório e a negligência disso pode levar a consequências graves, podendo até custar uma vida útil.
Então, quais são os métodos de esterilização mais utilizados no laboratório, e como funcionam? Leia em…
Método do Calor: Este é o método de esterilização mais comum. O calor é usado para matar os micróbios da substância. A extensão da esterilização é afetada pela temperatura do calor e pela duração do aquecimento. Com base no tipo de calor utilizado, os métodos de calor são categorizados em-
(i) Esterilização por Calor Molhado/Vapor – Na maioria dos laboratórios, este é um método amplamente utilizado que é feito em autoclaves… As autoclaves utilizam vapor aquecido a 121-134 °C sob pressão. Este é um método muito eficaz que mata/deactiva todos os micróbios, esporos bacterianos e vírus. A autoclavagem mata os micróbios por hidrólise e coagulação das proteínas celulares, o que é conseguido eficientemente através de calor intenso na presença de água. O calor intenso vem do vapor. O vapor pressurizado tem um alto calor latente e a 100°C retém 7 vezes mais calor do que a água à mesma temperatura. Em geral, as Autoclaves podem ser comparadas com uma panela de pressão típica utilizada para cozinhar, exceto na característica de que quase todo o ar é removido da autoclave antes do início do processo de aquecimento. As técnicas de esterilização por calor úmido também incluem a ebulição e pasteurização.
(ii) Esterilização por calor seco – Neste método, os espécimes contendo bactérias são expostos a altas temperaturas, seja por chama, incineração ou uma estufa de ar quente. A chama é utilizada para dispositivos metálicos como agulhas, bisturis, tesouras, etc. A incineração é usada especialmente para inocular loops usados em culturas microbianas. A extremidade metálica do laço é aquecida até ficar vermelha e quente na chama. O forno de ar quente é adequado para material seco como pós, alguns dispositivos metálicos, vidros, etc.
Filtração é a forma mais rápida de esterilizar soluções sem aquecimento. Este método envolve a filtragem com um tamanho de poro demasiado pequeno para a passagem de micróbios. Geralmente filtros com um diâmetro de poro de 0,2 um são utilizados para a remoção de bactérias. Os filtros de membrana são mais comumente usados em filtros sinterizados ou filtros de velas ou velas. Pode-se notar que vírus e fagos são muito menores que bactérias, portanto o método de filtração não é aplicável se estes forem a principal preocupação.
Esterilização por radiação: Este método envolve expor os materiais embalados a radiação (UV, raios X, raios gama) para esterilização. A principal diferença entre os diferentes tipos de radiação é a sua penetração e, portanto, a sua eficácia. Os raios UV têm baixa penetração e, portanto, são menos eficazes, mas é relativamente seguro e pode ser usado para esterilização de pequenas áreas. Os raios X e os raios gama têm um poder de penetração muito maior e, portanto, são mais eficazes para a esterilização em grande escala. É, no entanto, mais perigoso e, portanto, precisa de atenção especial. A irradiação UV é usada rotineiramente para esterilizar os interiores dos armários de segurança biológica entre utilizações. Os raios X são utilizados para esterilizar grandes embalagens e cargas de paletes de dispositivos médicos. A radiação gama é comumente usada para esterilização de equipamentos médicos descartáveis, como seringas, agulhas, cânulas e conjuntos IV, e alimentos.
p>Método químico de esterilização: O aquecimento fornece uma maneira confiável de se livrar de todos os micróbios, mas nem sempre é apropriado, pois pode danificar o material a ser esterilizado. Nesse caso, são utilizados métodos químicos de esterilização que envolvem o uso de líquidos nocivos e gases tóxicos sem afetar o material. A esterilização é eficaz utilizando gases, pois estes penetram rapidamente no material como o vapor. Existem alguns riscos, e as chances de explosão e fatores de custo devem ser considerados.
Os gases comumente usados para esterilização são uma combinação de óxido de etileno e dióxido de carbono. Aqui o dióxido de carbono é adicionado para minimizar as chances de uma explosão. O gás ozônio é outra opção que oxida a maioria da matéria orgânica. Peróxido de hidrogênio, dióxido de nitrogênio, soluções de glutaraldeído e formaldeído, ftalaldeído e ácido peracético são outros exemplos de produtos químicos utilizados para esterilização. Etanol e IPA são bons para matar células microbianas, mas não têm efeito sobre os esporos.