Sterilizarea poate fi realizată printr-o combinație de căldură, substanțe chimice, iradiere, presiune ridicată și filtrare, cum ar fi aburul sub presiune, căldura uscată, radiații ultraviolete, sterilizatori cu vapori de gaz, dioxid de clor gazos etc. Tehnicile eficiente de sterilizare sunt esențiale pentru a lucra într-un laborator, iar neglijarea acestora ar putea duce la consecințe grave, ar putea chiar să coste o viață.
Așadar, care sunt cele mai frecvent utilizate metode de sterilizare în laborator și cum funcționează acestea? Citiți mai departe…
Metoda termică: Aceasta este cea mai comună metodă de sterilizare. Căldura este folosită pentru a ucide microbii din substanță. Gradul de sterilizare este afectat de temperatura căldurii și de durata încălzirii. Pe baza tipului de căldură utilizat, metodele termice sunt clasificate în-
(i) Sterilizarea cu căldură umedă/cu abur- În majoritatea laboratoarelor, aceasta este o metodă utilizată pe scară largă care se face în autoclave…. Autoclavele utilizează abur încălzit la 121-134 °C sub presiune. Aceasta este o metodă foarte eficientă care ucide/dezactivează toți microbii, sporii bacterieni și virușii. Autoclavarea ucide microbii prin hidroliza și coagularea proteinelor celulare, care se realizează în mod eficient prin căldură intensă în prezența apei. Căldura intensă provine de la abur. Aburul presurizat are o căldură latentă ridicată și, la 100°C, reține de 7 ori mai multă căldură decât apa la aceeași temperatură. În general, autoclavele pot fi comparate cu o oală sub presiune tipică folosită pentru gătit, cu excepția trăsăturii că aproape tot aerul este eliminat din autoclavă înainte de începerea procesului de încălzire. Tehnicile de sterilizare prin căldură umedă includ, de asemenea, fierberea și pasteurizarea.
(ii) Sterilizarea prin căldură uscată- În această metodă, specimenele care conțin bacterii sunt expuse la temperaturi ridicate fie prin flacără, fie prin incinerare sau printr-un cuptor cu aer cald. Flacăra este utilizată pentru dispozitive metalice, cum ar fi ace, bisturie, foarfece etc. Incinerarea este utilizată în special pentru buclele de inoculare utilizate în culturile de microbi. Capătul metalic al buclei este încălzit la roșu pe flacără. Cuptorul cu aer cald este potrivit pentru materiale uscate, cum ar fi pulberile, unele dispozitive metalice, sticlărie etc.
Filtrarea este cea mai rapidă modalitate de sterilizare a soluțiilor fără încălzire. Această metodă presupune o filtrare cu o dimensiune a porilor prea mică pentru ca microbii să treacă prin ea. În general, pentru eliminarea bacteriilor se folosesc filtre cu un diametru al porilor de 0,2 um. Filtrele cu membrană sunt filtrele utilizate mai frecvent decât filtrele sinterizate sau filtrele seitz sau cu lumânare. Se poate remarca faptul că virușii și fagii sunt mult mai mici decât bacteriile, astfel încât metoda de filtrare nu se aplică dacă acestea reprezintă principala preocupare.
Sterilizarea prin radiații: Această metodă presupune expunerea materialelor ambalate la radiații (UV, raze X, raze gamma) pentru sterilizare. Principala diferență între diferitele tipuri de radiații este penetrarea lor și, prin urmare, eficacitatea lor. Razele UV au o penetrare scăzută și, prin urmare, sunt mai puțin eficiente, dar sunt relativ sigure și pot fi utilizate pentru sterilizarea suprafețelor mici. Razele X și razele gamma au o putere de penetrare mult mai mare și, prin urmare, sunt mai eficiente pentru sterilizarea pe scară largă. Cu toate acestea, este mai periculoasă și, prin urmare, necesită o atenție specială. Iradierea UV este utilizată în mod obișnuit pentru a steriliza interiorul dulapurilor de securitate biologică între utilizări. Razele X sunt utilizate pentru sterilizarea ambalajelor mari și a încărcăturilor de paleți de dispozitive medicale. Radiațiile gamma sunt utilizate în mod obișnuit pentru sterilizarea echipamentelor medicale de unică folosință, cum ar fi seringile, acele, canulele și seturile IV, precum și a alimentelor.
Metoda chimică de sterilizare: Încălzirea oferă o modalitate fiabilă de a scăpa de toți microbii, dar nu este întotdeauna adecvată, deoarece poate deteriora materialul care urmează să fie sterilizat. În acest caz, se folosesc metode chimice de sterilizare, care implică utilizarea de lichide nocive și gaze toxice fără a afecta materialul. Sterilizarea este eficientă folosind gaze, deoarece acestea pătrund rapid în material, precum aburul. Există câteva riscuri, iar șansele de explozie și factorii de cost sunt de luat în considerare.
Gazele utilizate în mod obișnuit pentru sterilizare sunt o combinație de oxid de etilenă și dioxid de carbon. Aici se adaugă dioxid de carbon pentru a minimiza șansele unei explozii. Gazul de ozon este o altă opțiune care oxidează majoritatea materiei organice. Peroxidul de hidrogen, dioxidul de azot, soluțiile de glutaraldehidă și formaldehidă, ftalaldehida și acidul peractic sunt alte exemple de substanțe chimice utilizate pentru sterilizare. Etanolul și IPA sunt bune la uciderea celulelor microbiene, dar nu au niciun efect asupra sporilor.