Borelióza je multisystémové onemocnění, které může zahrnovat dermatologické, muskuloskeletální, nervové nebo srdeční projevy (1). Původcem je spirocheta zvaná Borrelia burgdorferi. Nedávné studie ukázaly, že mezi kmeny obecně známými jako B burgdorferi existuje dostatečná genomická a fenotypová heterogenita, která opravňuje jejich rozdělení do tří genospécií: B burgdorferi, B garinii a třetí, v současnosti nepojmenovaný genospecies (2).
Borelióza byla hlášena ze Severní Ameriky, Evropy, Asie a Austrálie. Více než 30 000 případů bylo popsáno ze 46 amerických států, ačkoli většina případů byla hlášena pouze z osmi států (3). V mnoha státech, které hlásily boreliózu, nebyl B burgdorferi prokázán.
Borelióza je méně častá v Kanadě. V letech 1984-1990 bylo hlášeno pouze 140 případů a ve skutečnosti by mnoho z hlášených případů pravděpodobně nesplňovalo současnou definici případu boreliózy podle kanadského sledování (4). Terénní studie prokázaly endemický výskyt B burgdorferi v Long Point v jižním Ontariu (5) a B burgdorferi byla izolována z klíštěte Ixodes dammini odebraného na ostrově Prince Edwarda v roce 1991 (6). Blízce příbuzná spirocheta B hermsii, etiologický původce klíšťové horečky přenášené klíšťaty, byla nalezena v krvi pacientů v Britské Kolumbii (7,8). Nedávno byla u klíšťat v Britské Kolumbii pozorována další spirocheta (v současné době neidentifikovaná) (osobní sdělení).
Laboratorní centrum pro kontrolu nemocí (LCDC) spolupořádalo konsenzuální konferenci o borelióze, na které byla vypracována doporučení týkající se epizootologie, epidemiologie, klinické praxe a laboratorního vyšetřování boreliózy (4). Úřad pro epidemiologii přenosných nemocí (Bureau of Communicable Disease Epidemiology, LCDC) uchovává údaje o případech boreliózy u lidí, které se vyskytly v Kanadě, a sekce zoonotických nemocí (Zoonotic Diseases section, National Laboratory for Special Pathogens of the Bureau of Microbiology, LCDC) poskytuje laboratorní podporu. Tato laboratorní podpora zahrnuje společné vyšetřování s cílem určit rozšíření B burgdorferi v Kanadě, identifikaci předložených klíšťat, zahájení společného podniku na vytvoření příručky o identifikaci a rozšíření klíšťat v Kanadě, testování způsobilosti provinčních laboratoří veřejného zdraví, poskytování referenčních testů a hodnocení komerčních produktů.
V letech 1990-92 byly provedeny tři testy způsobilosti, kterých se zúčastnilo osm provinčních laboratoří veřejného zdraví. Uvedené sérologické testy zahrnovaly enzymatický imunosorbční test (elisa) prováděný všemi laboratořemi a také testy imunofluorescenčních protilátek (IFA) a Western Blot (WB) prováděné některými laboratořemi. Výsledky potvrdily, že elisa je spolehlivějším screeningovým testem než test IFA, i když byly získány falešně pozitivní a negativní sérologie. Celkově se citlivost testu elisa pohybovala od 42,9 do 100 %, přičemž většina citlivostí byla vyšší než 90 %, a specifičnost se pohybovala od 75 do 100 %. Několik laboratoří, které poskytly výsledky WB, mělo citlivost v rozmezí od 50 do 100 % a specifičnost od 60 do 100 %.
Kanadským laboratořím bylo doporučeno používat WB k potvrzení přítomnosti specifických protilátek v séru, které bylo pozitivní testem elisa (4). Dosavadní výsledky WB jako konfirmačního testu byly neuspokojivé. Od srpna 1990 do prosince 1992 bylo v LCDC testováno jedno nebo více elisa pozitivních sér od 40 pacientů pomocí komerčního WB testu s následujícími výsledky: 9 (22,5 %) negativních, 9 (22,5 %) pozitivních a 22 (55,0 %) neurčitých. WB tedy dokázal jasně rozlišit reaktivitu pouze u 45 % těchto pacientů.
Neexistují žádná standardní kritéria pro interpretaci WB testu na boreliózu. Některé laboratoře jednoduše hledají čtyři nebo více určených pásů, zatímco jiné laboratoře vyžadují specifický vzorec reaktivních pásů, např. reakci s pásem 41 kDa bičíkového proteinu a alespoň jedním pásem odpovídajícím nízkomolekulárním proteinům 18, 21,5 nebo 23 kDa (9). Během infekce dochází k počáteční reakci na 41 kDa protein, po které následuje v průběhu několika měsíců variabilní odstupňovaná reakce až na 10 nebo více proteinů. Tato opožděná exprese může souviset s rozpadem strukturální integrity bakterií s následnou prezentací dříve chráněných imunogenních složek nebo možná v důsledku zvýšené aktivity supresorových buněk, která, jak bylo prokázáno u časných onemocnění, může omezit počáteční protilátkovou odpověď na celé spektrum bakteriálních antigenů (10).
Přes tyto problémy vlastní testu WB na boreliózu může tento test stále hrát užitečnou roli. Rose et al (11) zkoumali séra pacientů a ukázali, že pozitivní výsledky WB i elisa testu poskytují silnou diagnostickou podporu boreliózy, zatímco pozitivní elisa test s negativním WB byl obecně spojen s absencí klinických příznaků boreliózy. Nedávno Banerjee et al (12) použili WB jako nástroj k prokázání, že titry IFA na B burgdorferi a B hermsii u pacientů v Britské Kolumbii byly pravděpodobně způsobeny nespecifickými reakcemi, a k závěru, že je nepravděpodobné, že by borrelióza byla příčinným faktorem jakýchkoli chronických artropatií pozorovaných v Britské Kolumbii.
Existuje několik komerčních WB souprav a sekce zoonotických nákaz plánuje v příštím roce provést hodnocení těchto produktů, aby určila jejich relativní výhody. Je důležité neztrácet ze zřetele skutečnost, že diagnostika boreliózy vyžaduje odpovídající klinický obraz a laboratorní testy slouží především jako podpůrné. Nicméně nedávná izolace B burgdorferi ze zdánlivě neendemické provincie Ostrov prince Edwarda (6) ukazuje, jak je důležité mít k dispozici vhodné testy k rozpoznání sporadických případů, které se mohou v Kanadě vyskytnout.