Daniela Cortés-Beltrán & Angela Gonella D. DVM, PhD, North Florida Research and Education Center, Reproduction Lab
Introduzione
L’inseminazione artificiale (AI) è una tecnologia di riproduzione assistita (ART) utilizzata in tutto il mondo per depositare il seme immagazzinato direttamente nell’utero di una mucca o di una giovenca. È uno strumento per migliorare le prestazioni riproduttive e la qualità genetica del bestiame. Questa tecnica è frequentemente utilizzata nell’industria del bestiame da latte e da carne come un modo per migliorare più rapidamente le caratteristiche desiderate attraverso la selezione genetica intensiva. L’IA presenta notevoli vantaggi, come quello di facilitare l’uso di tori di qualità superiore (senza la spesa e il rischio della proprietà) e di ridurre notevolmente il rischio di introdurre malattie veneree nella mandria (Fontes, Oosthuizen, & Cliff Lamb, 2020; Noackes et al., 2001; Vishwanath, 2003). È importante sottolineare che seguire attentamente il protocollo raccomandato è essenziale perché il processo abbia successo. L’obiettivo di questo articolo è quello di offrire suggerimenti per un utilizzo di successo dell’IA nella vostra operazione.
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Kit IA e Igiene
Il kit di inseminazione di base dovrebbe contenere una pistola IA in acciaio inossidabile, un tagliapaglia o forbici, pinzette, lubrificante non spermicida, termometro e unità di scongelamento (bagno ad acqua o thermos a bocca larga). Inoltre, forniture monouso come guaine di plastica divise, coperture sanitarie, guanti di plastica per la palpazione e asciugamani di carta (Figura 1). Il kit AI deve essere conservato in un luogo asciutto, privo di polvere e pulito. È importante pulire il kit prima e dopo aver eseguito l’IA.
Figura 1. Kit AI di base
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Gestione del serbatoio di azoto liquido
Un controllo periodico dei livelli di azoto liquido nel serbatoio è necessario per garantire che le cannucce siano completamente immerse. Ricordate sempre che l’azoto liquido può causare lesioni da ustione da freddo agli operatori, se non viene maneggiato con cura. Il serbatoio deve essere conservato in un luogo pulito, asciutto e ben ventilato. Il serbatoio deve essere protetto da superfici corrosive e bagnate, quindi si consiglia di tenerlo sollevato da terra utilizzando cartone o pallet di legno. Inoltre, è molto importante mantenere una lista d’inventario con informazioni complete dello sperma conservato all’interno del serbatoio, facilitando una rapida localizzazione con una limitata manipolazione delle cannucce nel serbatoio.
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Manipolazione dello sperma
È fondamentale gestire correttamente lo sperma una volta che la cannuccia viene rimossa dal serbatoio dell’azoto liquido. Si vuole tenere il contenitore, la canna e le cannucce inutilizzate il più vicino possibile al collo del serbatoio per non più di 5 – 8 secondi, evitando l’esposizione ad alte temperature, che promuove il danno termico (Figura 2A).
L’estrazione della cannuccia deve essere fatta sotto la metà inferiore del collo del serbatoio di stoccaggio, dove la temperatura è sufficientemente fredda (-120º C (-184º F)) (Hopper, 2015). Per evitare questo rischio, è fondamentale avere una manipolazione efficiente per ridurre al minimo il tempo di esposizione fuori dal serbatoio, per mantenere la qualità del seme congelato. Per questo motivo è importante maneggiare le cannucce con delle pinzette invece che con le dita per evitare danni termici al seme ed evitare anche possibili lesioni all’operatore (Figura 2B).
Figura 2. Tecnica corretta di manipolazione dello sperma. A. Rimozione della paglia vicino al collo del serbatoio di stoccaggio. B. Uso di pinzette e guanti per la sicurezza dell’operatore.
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Un’altra questione principale è la corretta procedura di scongelamento dello sperma; lo scongelamento deve avvenire rapidamente e alla giusta temperatura. Secondo la National Association of Animal Breeders è opportuno usare 30 – 35º C (90 – 95º F) per un minimo di 30 secondi. Usare sempre un bagno d’acqua o un thermos per lo scongelamento a bocca larga con un termometro per un monitoraggio accurato della temperatura (Figura 3A). È anche una buona idea usare un timer per contare 30 – 60 secondi prima di rimuovere la cannuccia dall’unità di scongelamento.
Una volta che la cannuccia è scongelata, lo sperma dovrebbe essere depositato nell’utero entro 15 minuti. Tassi di concepimento più bassi possono derivare da cannucce di sperma tenute troppo a lungo nel bagno d’acqua, o dall’esposizione prolungata all’ambiente in attesa di essere depositato nell’utero (Duponte, 2007). Quindi, a meno che non si utilizzi un tecnico AI esperto in grado di allevare più vacche in questo periodo di tempo di 15 minuti, si raccomanda di scongelare solo una o due cannucce alla volta.
Dopo lo scongelamento, la cannuccia dovrebbe essere:
- Asciugata con un tovagliolo di carta per rimuovere tutta l’acqua (agente altamente spermicida; Figura 3B).
- Protetta dalla luce diretta del sole o dai raggi UV (danni alle cellule spermatiche)
- Protetta da drastici cambiamenti di temperatura, che causano shock termico (diminuzione della motilità).
Figura 3. Processo di scongelamento dello sperma. A. Monitoraggio della temperatura dell’acqua con controllo del tempo per un corretto scongelamento. B. Corretta asciugatura della cannuccia.
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La pistola AI dovrebbe essere riscaldata accarezzandola con un tovagliolo di carta pulito, o mettendola vicino al corpo prima di inserire la cannuccia per evitare lo shock termico. Inoltre, quando si carica la pistola per sperma, è essenziale:
- Assicurarsi che il tappo della pistola AI sia retratto per permettere l’inserimento della cannuccia.
- Inserire la cannuccia con l’estremità del tappo di cotone prima.
- Fare un taglio dritto perpendicolare (non ad angolo) sul lato sigillato, con un tagliapaglia pulito e affilato o con le forbici, per avere una buona aderenza con la guaina sanitaria.
- Far scorrere e attaccare la guaina di plastica divisa e bloccarla saldamente con la pistola AI, quindi controllare la corretta tenuta.
- Proteggere la guaina con una guaina sanitaria per evitare il contatto tra la guaina AI e la vagina dell’animale, per ridurre il rischio di contaminazione da batteri uterini.
- Tenere la pistola AI carica calda e isolata da superfici sporche fino a quando non viene utilizzata.
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Tecnica di inseminazione corretta
Nei bovini, l’AI viene eseguita con una tecnica retto-vaginale. È necessario che l’operatore sia precedentemente addestrato in questa tecnica, anche se non è difficile, richiede alcune abilità e formazione per garantire buoni risultati. Una corretta manipolazione della pistola seminale e la capacità di depositare il seme nella posizione corretta all’interno dell’utero sono vitali (Diskin & Kenny, 2016).
Prima di iniziare:
- È necessario controllare che tutte le forniture siano pronte per iniziare la procedura di IA
- L’operatore deve indossare abiti protettivi puliti e deve avere le unghie tagliate corte.
- Prestare molta attenzione all’igiene della zona perineale dell’animale per evitare la contaminazione del tratto riproduttivo con agenti patogeni.
Prima di tutto, è necessario limitare l’animale il più attentamente e delicatamente possibile prima dell’inseminazione per minimizzare lo stress. Poi, la regione della vulva deve essere pulita. Utilizzare un tovagliolo di carta per rimuovere le feci, per evitare la contaminazione e una possibile infezione nell’utero, che deve essere un ambiente sterile.
Utilizzare un guanto di plastica monouso per la palpazione per animale con abbastanza lubrificante non spermicida per entrare delicatamente nell’ano per raggiungere il retto. Una volta che il braccio è all’interno, aprire le labbra vulvari mentre si applica una pressione sul retto con il braccio, per consentire l’ingresso della pistola da inseminazione. Il gunt AI deve essere inserito con un angolo di 30-40º nella vulva, per evitare l’ingresso attraverso l’apertura uretrale nella vescica, situata sul pavimento vaginale.
Per eseguire il metodo AI retto-vaginale, è essenziale tenere la cervice attraverso il retto per dirigere la pistola di inseminazione in avanti nella vagina fino a raggiungere l’apertura della cervice. Successivamente, è necessario schivare il fornice della vagina e dirigere la pistola per l’inseminazione nella cervice con la manipolazione attraverso la parete rettale. Una volta raggiunta, la copertura sanitaria deve essere strappata per entrare nella cervice, ci sarà una caratteristica sensazione di grinta, e gli anelli della cervice devono essere passati. Di conseguenza, l’animale verrà inseminato con un movimento basso e delicato nel corpo uterino, a soli 1 – 2 cm dall’ingresso dell’apertura interna della cervice (Noakes et al., 2001).
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Posizionamento dello sperma
Il corretto posizionamento dello sperma nel corpo uterino migliora i tassi di gravidanza per inseminazione. È stato riportato che gli errori di inseminazione cervicale si verificano in circa il 20% dei tentativi di deposito nel corpo uterino (Diskin & Kenny, 2016). Inoltre, è essenziale non andare troppo in profondità in uno dei corni uterini, a causa dell’alto rischio di depositare il seme nel corno uterino sbagliato per l’ovulazione (Figura 5; Noakes et al., 2001).
Figura 4: Tratto riproduttivo della mucca. Foto originale per gentile concessione della Dr. Cláudia Maria Bertan Membrive.
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Take Home Message
Molteplici variabili influenzano il successo dell’inseminazione artificiale nei bovini, ed è molto importante prestare attenzione ai dettagli. Consultate il vostro veterinario o l’agente locale prima di implementare un programma di inseminazione artificiale nella vostra azienda. È possibile combinare l’IA con protocolli di sincronizzazione estrale, che consentono di utilizzare l’IA temporizzata per allevare gruppi di animali tutti allo stesso tempo.
Diskin, M. G., & Kenny, D. A. (2016). Gestire le prestazioni riproduttive delle vacche da carne. Theriogenology, 86(1), 379-387.
Duponte, M. W. (2007). Corretta manipolazione del seme durante un programma di inseminazione artificiale, (aprile). Livestock Management:
Fontes, P. L. P., Oosthuizen, N., & Cliff Lamb, G. (2020). Gestione riproduttiva dei bovini da carne. Agricoltura animale, 57-73.
Vishwanath, R. (2003). Inseminazione artificiale: Lo stato dell’arte. Teriogenologia, 59(2), 571-584.
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