OMIM Entry – * 176741 – MARKER DI PROLIFERAZIONE KI67; MKI67

TESTO

MKI67 è una proteina nucleare 359-kD comunemente utilizzata per rilevare e quantificare le cellule proliferanti, con un aumento dell’espressione associata alla crescita cellulare. L’espressione di MKI67 riflette il tasso di proliferazione cellulare, e MKI67 è ampiamente utilizzato come marcatore diagnostico in vari tipi di cancro (sintesi di Hou et al., 2011).

Con l’immunoscreening di una libreria di espressione cDNA, seguita da RT-PCR e RACE 5-prime e 3-prime, Schluter et al. (1993) hanno isolato 2 cDNA che codificano isoforme di Ki-67. L’isoforma più corta manca dell’esone 7. L’analisi del Northern blot ha rivelato trascrizioni multiple che vanno da circa 8,9 a 12,5 kb in cellule proliferanti ma non quiescenti. L’analisi dell’immunoblot ha mostrato l’espressione di proteine da 320 e 359 kD. L’analisi delle sequenze ha previsto che le isoforme proteiche a vita breve di 2.896 e 3.256 amminoacidi contengono potenziali segnali di destinazione nucleare, oltre 200 potenziali siti di fosforilazione, 19 siti di N-miristoilazione, 3 siti di amidazione e numerosi siti PEST.

Schluter et al. (1993) hanno scoperto che gli oligonucleotidi antisenso al Ki-67 inibiscono la proliferazione cellulare in modo dose-dipendente, suggerendo che l’espressione della proteina Ki-67 può essere un requisito assoluto per la proliferazione cellulare.

Hou et al. (2011) hanno dimostrato che il microRNA-519D (MIR519D; 614247) è stato downregolato nei carcinomi epatocellulari umani (HCC) e che l’espressione di MIR519D potrebbe sopprimere la crescita nella linea cellulare HCC umana QGY-7703. L’analisi bioinformatica ha rivelato un potenziale sito di legame MIR519D nel 3-primo UTR di MKI67. La sovraespressione di MIR519D ha significativamente downregolato MKI67 e ridotto la formazione di colonie di cellule QGY-7703. La RT-PCR ha rivelato un aumento complessivo dell’espressione di MKI67 e una diminuzione dell’espressione di MIR519D in 10 HCC rispetto al tessuto normale adiacente.

Nei topi, Takeo et al. (2013) hanno dimostrato che le cellule staminali ungueali (NSC) risiedono nella matrice ungueale prossimale e sono definite da un’elevata espressione di cheratina-14 (148066), cheratina-17 (148069) e KI67. I meccanismi che governano la differenziazione delle NSC sono accoppiati direttamente alla loro capacità di orchestrare la rigenerazione delle dita. I progenitori ungueali precoci subiscono una differenziazione Wnt (vedi 164820) dipendente dall’unghia. Dopo l’amputazione, questa attivazione di Wnt è necessaria per la rigenerazione dell’unghia e anche per attirare i nervi che promuovono la crescita del blastema mesenchimale, portando alla rigenerazione del dito. Le amputazioni prossimali ai progenitori ungueali Wnt-attivi portano alla mancata rigenerazione dell’unghia o del dito. Tuttavia, la stabilizzazione della beta-catenina (116806) nella regione NSC ha indotto la loro rigenerazione. Takeo et al. (2013) hanno concluso che i loro risultati hanno stabilito un legame tra la differenziazione delle cellule staminali ungueali e la rigenerazione delle dita, e hanno suggerito che le NSC possono avere il potenziale per contribuire allo sviluppo di nuovi trattamenti per le persone amputate.

Cuylen et al. (2016) hanno riferito che la proteina marker di proliferazione KI67, codificata dal gene MKI67, un componente della periferia mitotica dei cromosomi, impedisce ai cromosomi di collassare in una singola massa di cromatina dopo lo smontaggio dell’involucro nucleare, consentendo così la motilità indipendente dei cromosomi e interazioni efficienti con il fuso mitotico. La funzione di separazione dei cromosomi del KI67 umano non era confinata all’interno di un dominio proteico specifico, ma era correlata alla dimensione e alla carica netta dei mutanti troncati che apparentemente mancavano di struttura secondaria. Questo ha suggerito che KI67 forma una barriera di carica sterica ed elettrostatica, simile agli agenti tensioattivi (tensioattivi) che disperdono particelle o goccioline liquide separate in fase nei solventi. La spettroscopia di correlazione della fluorescenza ha mostrato un’alta densità di superficie di KI67, e l’etichettatura a due colori di entrambi i termini della proteina ha rivelato una conformazione molecolare estesa, indicando disposizioni a spazzola che sono caratteristiche dei tensioattivi polimerici. Cuylen et al. (2016) hanno concluso che il loro studio ha chiarito un ruolo biomeccanico della periferia del cromosoma mitotico nelle cellule di mammifero e hanno suggerito che le proteine naturali possono funzionare come tensioattivi nella compartimentazione intracellulare.

Cuylen-Haering et al. (2020) hanno dimostrato in cellule HeLa che grandi componenti citoplasmatiche sono state spostate prima dell’assemblaggio dell’involucro nucleare dal movimento dei cromosomi in un cluster denso durante la mitosi. Il raggruppamento avviene quando i cromosomi si avvicinano ai poli dei fusi dell’anafase ed è mediato da un meccanismo indipendente dai microtubuli che coinvolge Ki67. Ki67 ha formato spazzole molecolari repulsive durante le prime fasi della mitosi, ma durante l’uscita mitotica le spazzole sono crollate e Ki67 ha promosso il raggruppamento dei cromosomi. L’esclusione dei ribosomi maturi dal nucleo dopo la mitosi dipendeva dal raggruppamento dei cromosomi regolato da Ki67.

Schluter et al. (1993) hanno determinato che il gene Ki-67 contiene 15 esoni. La regione di ripetizione del Ki-67, all’interno della quale c’è un motivo Ki-67 di 22 aminoacidi, è codificata dall’esone 13.

Dallo studio di un pannello di ibridi di cellule somatiche uomo-rodente, Schonk et al. (1989) hanno dimostrato che un gene coinvolto nell’espressione dell’antigene MKI67 si trova sul cromosoma 10. Con l’ibridazione in situ, Fonatsch et al. (1991) hanno regionalizzato il gene MKI67 al cromosoma 10q25-qter. Tramite FISH, Traut et al. (1998) hanno mappato il gene Mki67 del topo al cromosoma 7F3-F5.